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【柏恒科技小課堂】qPCR反應漫談(續)
【柏恒科技小課堂】qPCR反應漫談(續) 發布時間:2026-01-04
在上一期的qPCR反應漫談中,從一開始沃森和克里克兩位基因學奠基人的兩個論點簡單延伸至染料法和探針法兩類常見的qPCR反應。這一期做一個從PCR反應過程出發到一些實驗問題優化的分享。01(先拋磚)PCR反應原理:PCR通過變性、退火和延伸三個步驟的循環往復,模擬DNA在體外擴增的...
  • 2022

    4-19
    核酸提取儀使用注意事項
    核酸提取儀主要由磁套、磁棒、進給板和步進電機四個部分組成;磁套位于磁棒的下方且對齊形成一對互相配合使用,進給板位于磁套的下方;磁套、磁棒和進給板分別連接一個步進電機;磁套和磁棒的步進電機控制磁套和磁棒的上下相對運動,與進給板相接的步進電機控...
  • 2022

    4-12
    實時熒光定量PCR儀使用的基本步驟
    實時熒光定量PCR儀技術的原理:體外核酸擴增,加熱使雙鏈DNA解開螺旋,在退火溫度條件下引物同模板DNA雜交,在TaqDNA聚合酶,dNTPs(脫氧核糖核苷三磷酸),Mg2+和合適pH緩沖液存在條件下延伸引物,重復“變性→退火一引物延伸”過...
  • 2022

    4-6
    程序降溫盒使用經驗分析
    程序降溫盒的使用方法直都搞不明白,覺得是不是應該把程序降溫凍存盒先從-80度移到室溫放一段時間(細胞剛開始還沒凍的時候就是室溫),然后把細胞放進去,再一起移到-80度,這樣才能實現程序降溫呢?時間使用長了,感覺里面的液體是不是異丙醇啊,使用...
  • 2022

    3-23
    三槽梯度PCR儀你真的了解嗎?
    一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之為梯度PCR儀。通過設置一系列的梯度退火溫度進行擴增,從而一次性PCR擴增就可以篩選出表達量高的適合退火溫度進行有效的擴增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴增,這...
  • 2022

    3-16
    程序降溫盒使用小技巧
    程序降溫盒在沒有酒精或任何液體的情況下,能確保在低溫冰箱中樣品的降溫速率為-1℃/分鐘。它們可以運用于各種細胞類型,包括干細胞,原代細胞和細胞系。這對于大多數需要培養的細胞系來說是非常理想的。已經通過干細胞,原代細胞和細胞系的使用,證明了提...
  • 2022

    3-10
    迷你梯度PCR儀常用的五種分析方法
    迷你梯度PCR儀的梯度溫度控制是一項可有助于PCR中引物退火優化的功能。梯度設定的目的是在模塊之間實現變化的溫度,通過每列之間≥2°C的間隔溫度升降,使得可同時對于一系列的溫度進行測試以獲取引物退火溫度。該技術的一種形式便是設計帶有三個或更...
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